코스모진텍
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  • Protein Expression

ProteinPurifcation

  • 서비스 종류

서비스 종류

  • Bacterial Expression
  • Baculovirus Expression

서비스 개요

    • Bacterial expression (E.coli) 시스템은 경제성, 기간 및 생산량에 있어서 여타의 시스템에 비해 비교우위에 있어서 아직까지도 가장 일반적으로 사용되고 있는 재조합 단백질 생산시스템입니다. 현재까지 다양한 vector, host, fusion partner, soluble expression 방법 및 refolding 방법들이 개발되어 왔고, 최근에는 codon을 E.coli에 적합하게 변형한 재조합 유전자를 합성하여 생산량을 개선하는 방법도 사용되고 있습니다. 코스모진텍에서는 E.coli에서 재조합 단백질 생산을 위한 vector 구축에서부터 발현 최적화 및 정제까지 일련의 체계적인 서비스를 제공해 드립니다.

서비스 내용

    • - Expression optimization
    • Host : Vector system에 적합한 E.coli host 제안
    • IPTG concentration : 2 points (0.2 mM, 1 mM)
    • Temperature & time : 3 points (18℃ 16 hr, 26℃ 6 hr, 37℃ 4 hr)
    • Solubility test
    • - Scale-up & purification
    • 1 L scale culture
    • Affinity purification (His, GST, MBP tag) with FPLC (GE healthcare)
    • Dialyzed into desired storage buffer
    • Quantification by Bradford assay
    • - Affinity tag removal
    • Affinity tag과 target protein 사이의 proteinase site cleavage
    • Endoprotease : Thrombin, Enterokinase, Factor Xa, TEV protease
    • - Refolding
    • Inclusion body purification
    • Denaturing affinity chromatography
    • On-Column refolding

활용 분야

    • Protein functional study
    • Protein in vitro binding assay
    • Enzyme preparation
    • Antigen preparation for antibody generation
    • Standard antigen for immunoassay

서비스 개요

    • Baculovirus expresssion 시스템은 발현하고자 하는 유전자가 삽입된 재조합 baculovirus를 곤충세포에 감염하여 재조합 단백질을 대량 생산하는 시스템으로서, bacterial expression 시스템에는 없는 post-translational modification을 문제를 해결해 줄 뿐만 아니라, mammalian expression 시스템에서의 장기간, 고비용 및 생산수율 문제를 해결해 줄 수 있는 eukaryotic 발현 시스템입니다. 당사에서는 재조합 baculovirus 제작에서부터 발현 정제까지 일련의 체계적인 서비스를 제공해 드립니다.

서비스 내용

    • - Donor vector construction
    • - Generation of recombinant baculovirus
    • - Clone isolation by plaque assay
    • - Preparation of high titer recombinant virus stock
    • - Large scale expression culture
    • - Recombinant protein purification

활용 분야

    • - Eukaryotic protein expression
    • - Protein in vitro binding assay
    • - Development of virus-like particles (VLP)
    • - Production of subunit vaccine
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