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Gene Cloning

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서비스 종류

  • Custom cloning
  • TA cloning
  • Mutagenesis
  • Gateway cloning
  • Plasmid large prep
  • 5'/3' RACE
  • in vitro transcription

서비스 개요

    • 코스모진텍은 다양한 유전체 소스 (cloned DNA, genomic DNA, RNA, Cell, Tissue 등)로부터 원하는 유전자를 연구목적에 적합한 vector에 cloning해 드립니다. 또한, 자연계에 존재하지 않는 염기서열이나 특정 종에 대한 codon 최적화가 필요한 염기서열의 경우 유전자 합성을 통하여 cloning해 드립니다. 수년간 쌓아온 풍부한 경험과 자원을 바탕으로 vector 선정에서부터 construct 구조 및 cloning strategy까지 체계적으로 상담해드리고, 신속 정확하게 결과물을 제공해 드립니다.

서비스 내용

    • - Construct design
    • - Primer design
    • - PCR optimization
    • - Ligation-independent cloning
    • - Simultaneous or stepwise cloning of multiple gene
    • - Full sequencing of inserted gene
    • - 주기적 경과보고 및 최종 결과보고서 (sequencing raw data, 진행경과보고서)

연계 서비스

    • - Mutagenesis, Large prep service, Protein expression, transfection, cell line construction

Workflow

서비스 소개

    • TA cloning은 proofreading 기능이 없는 Taq polymerase의 경우 3' 말단에 주로 "A"를 추가하는 성질을 이용하여 PCR 산물을 특별한 처리없이 전용 T-vector (3'end T-tailed vector)에 바로 cloning하는 간편한 cloning기법입니다.

서비스 내용

    • - Primer design
    • - PCR optimization
    • - Clone과 sequence 모두 원할 경우 : colony PCR, miniprep & sequencing
    • - Sequence만 확인하고자 할 경우 : colony PCR & direct sequencing
    • - 주기적 경과보고 및 최종 결과보고서 (sequencing raw data, 진행경과보고서)

활용 분야

    • - Keeping specific DNA fragments permanently
    • - Shotgun cloning of randomly amplified fragments
    • - Discrimination of mixed variants or alleles
    • - Identification of microbial flora
    • - Methylation analysis by bisulfite sequencing

서비스 개요

    • 특정 유전자에 point mutation에서부터 광범위한 insertion 및 deletion mutation까지 연구목적에 적합한 mutant clone을 제작해 드리는 서비스입니다.
      본 서비스에서는 기확보된 clone의 mutagenesis뿐만 아니라 최초 cloning 단계에서부터 특정 mutation을 도입해 드리는 서비스까지 제공됩니다.

서비스 내용

    • - Quickchange site-directed mutagenesis : Small-scale mutagenesis (<10 bp) on an existing vector
    • - Overlap PCR method : massive insertion or deletion mutation, gene assembly or fusion
    • - Full sequencing of target gene
    • - 주기적 경과보고 및 최종 결과보고서 (sequencing raw data, 진행경과보고서)

연계 서비스

  • - Large prep service, Protein expression, transfection, cell line construction

서비스 개요

    • Invitrogen사에서 개발한 Gateway cloning법은 bacteriophage λ가 자신의 genome을 E.coli chromosome에 intergration하거나 excision하는 과정에서 작용하는 효소들을 이용하여 site-specific (att) recombination으로 유전자를 cloning하는 방법입니다. 이 기법은 현재 invitrogen사에서 개발한 다양한 vector system에 적용하고 있고, 연구자들이 직접 개량한 다양한 mammalian 및 plant expression vector에 널리 사용되고 있습니다. 본 시스템의 가장 큰 장점은 하나의 entry clone만 제작하면 여러 종류의 destination vector에 손쉽게 subcloning할 수 있다는 점입니다.

서비스 내용

    • - Entry clone construction
    • - LR reaction : Subcloning the gene of interest from the Entry clone into a Destination Vector
    • - BP reaction : Cloning the gene of interest into an Entry Vector
    • - Full sequencing of inserted gene
    • - 주기적 경과보고 및 최종 결과보고서 (sequencing raw data, 진행경과보고서)

연계 서비스

    • - Mutagenesis, Large prep service, Protein expression, transfection, cell line construction

서비스 개요

    • 배양세포 및 실험동물에 직접 도입하기 위한 다량의 고순도 plasmid DNA를 정제해 드리는 서비스로서, 품질과 성능이 검증된 kit를 사용하여 서비스를 제공해 드립니다. 정제된 DNA는 sequencing 또는 제한효소 mapping을 통하여 의뢰하신 샘플과 일치 여부를 확인해드리고, 정확한 순도 및 정량 분석결과가 같이 제공됩니다.

서비스 내용

  • Large prep scale Maxiprep Megaprep Gigaprep
    Copy number High Low High Low High Low
    Culture volume 100 ml 500 ml 500 ml 2.5 L 2.5 L 5 L
    Expected yield 300-500 ug 100-500 ug 1.5-2.5 mg 0.5-2.5 mg 5-10 mg 1-5 mg
    Purity 260/280 ratio 1.8~2.0
  • * Expected yield는 일반적인 기대수율로 특정 vector에서는 수율이 예상보다 현저히 낮을 수 있습니다.
    * 정제 후 추가 서비스 (linearization 등)가 필요할 경우 당사에 문의 바랍니다.

서비스 개요

    • RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)는 RNA에서 이미 확인된 일부분의 내부염기서열을 이용하여 미지의 5' 및 3' 말단 영역 염기서열을 확인하는 RT-PCR기법으로서, 주로 mRNA를 대상으로 genomic DNA상의 mRNA의 정확한 영역을 확인하여 transcription start 및 stop 위치를 mapping하는데 활용됩니다. 본 서비스를 통하여 mRNA, viral RNA 등의 말단 서열을 확인할 수 있습니다.

서비스 내용

    • - 5'RACE : cDNA circularization method
    • - 3'RACE : Classical method using poly(A) tailing

서비스 소개

    • T7, T3 또는 Sp6 promoter 이하에 삽입되어 있는 유전자를 각각의 RNA polymerase를 사용하여 in vitro에서 RNA로 transcription한 후 정제해 드리는 서비스입니다.

활용 분야

    • - RNA probe 제작 (동위원소 표지는 불가)
    • - mRNA 합성 (5' capping 및 polyA tailing은 별도)
    • - Antisense RNA 제작
    • - Artificial viral RNA 제작

결과 확인

  • Cosmogenetech Cloning Service는 다양한 cloning 기법과 풍부한 연구경험을 바탕으로 연구자분들의 실험에 적합한 맞춤형 서비스를 제공합니다.

Alignment

Strategy view

서비스 가격

  • Service type Item Price (₩) note
    TA cloning 200,000 * Insert size 1.3kb 기준으로 초과되는 600bp당 5만원추가

    * mixed template (cDNA & gDNA)
    : PCR setup 5만원 추가 유전자 크기에 따라 fragmentation 여부 결정
    Custom cloning 300,000
    Mutagenesis Quickchange method 300,000
    Overlap PCR method 450,000
    Gateway cloning Entry clone 300,000
    LR recombination 300,000
    RACE 5'RACE 800,000  
    3'RACE 500,000  
    3'RACE for RNA w/o PolyA 800,000  
    Gene Synthesis
    (Subcloning 서비스 연계 주문시)
    < 3 kb 450/bp Minimum Charge : 156,000원
    3~5 kb 별도문의  
    > 5 kb 별도문의  
      Maxiprep service 100,000 * total 100 ug 보장 (low copy 제외)
    In vitro transcription 200,000  
    RNA gel electrophoresis 50,000 * 10 sample/gel
    PCR optimization 100,000 * Cloning 연계시 50,000원
    cDNA synthesis 20,000  
    RNA extraction 30,000  
    Genomic DNA extraction 10,000  
    Oligo annealing 10,000  
    Transformation 30,000 * Miniprep, cell stock 제공
    Plasmid linearization 50,000 * Digestion & purification, 10 ug 보장
    Primer design (set) 10,000  
  • ※ 비용은 해당 의뢰건의 최초 주문 시 결정된 실험방법에 근거하여 산정되며, 서비스 기간 중 의뢰인 요청에 의해 실험방법이 변경되어 발생하는 비용은 추가로 부과됩니다.
    ※ Vector와 insert를 포함하는 total size가 12 Kb 이상일 경우 성공 확률이 낮아지므로 별도 문의 바랍니다.
    ※기본 Mutagenesis (Quick Change method)는 conventional whole vector PCR법으로 진행하므로 원하는 부위외에 다른 부위에서 mutation이 발생할 수 있습니다.
        특정부위 sequencing 필요 시 추가 비용이 발생합니다.
    ※ 10 kbp 이상 벡터에 대해 Site-directed Mutagenesis 의뢰 시 Overlap PCR method방식으로 진행합니다.

FAQ

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